Vit blodkroppsdifferens - White blood cell differential

Vit blodkroppsdifferens
Neutrofil (vänster) och lymfocyter (höger) sett mikroskopiskt på blodutstryk
Synonymer	Differential leukocytantal, leukogram, autodiff, manuell diff
Syfte	Beskriva populationer av vita blodkroppar i perifert blod
MedlinePlus	003657
eMedicine	2085133
LOINC	33255-1 , 24318-8 , 69738-3

En skillnad i vita blodkroppar är ett medicinskt laboratorietest som ger information om typerna och mängderna av vita blodkroppar i en persons blod. Testet, som vanligtvis beställs som en del av ett fullständigt blodtal (CBC), mäter mängderna av de fem normala vita blodkroppstyperna - neutrofiler , lymfocyter , monocyter , eosinofiler och basofiler  - samt onormala celltyper om de är närvarande . Dessa resultat rapporteras som procenttal och absoluta värden och jämförs med referensintervall för att avgöra om värdena är normala, låga eller höga. Förändringar i mängderna av vita blodkroppar kan hjälpa till med diagnosen av många hälsotillstånd, inklusive virus- , bakterie- och parasitinfektioner och blodsjukdomar som leukemi .

Vita blodkroppsdifferentialer kan utföras av en automatiserad analysator  - en maskin som är utformad för att köra laboratorietester - eller manuellt genom att undersöka blodutstryk under ett mikroskop. Testet utfördes manuellt tills differentiella analysatorer för vita blodkroppar introducerades på 1970-talet, vilket möjliggjorde den automatiska differentieringen . I den automatiserade differentialen laddas ett blodprov på en analysator, som provar en liten volym blod och mäter olika egenskaper hos vita blodkroppar för att producera ett differentiellt antal. Den manuella differentialen , där vita blodkroppar räknas på ett färgat mikroskopglas, utförs nu för att undersöka onormala resultat från den automatiska skillnaden, eller på begäran av vårdgivaren. Den manuella skillnaden kan identifiera celltyper som inte räknas med automatiserade metoder och detektera kliniskt signifikanta förändringar i utseendet på vita blodkroppar.

År 1674 publicerade Antonie van Leeuwenhoek de första mikroskopiska observationerna av blodceller. Förbättringar av mikroskopteknik under 1700- och 1800-talet gjorde det möjligt att identifiera och räkna de tre cellulära komponenterna i blodet. På 1870-talet uppfann Paul Ehrlich en färgningsteknik som kunde skilja mellan varje typ av vita blodkroppar. Dmitri Leonidovich Romanowsky modifierade senare Ehrlichs fläck för att producera ett bredare utbud av färger, vilket skapade Romanowsky-fläcken , som fortfarande används för att fläcka blodutstryk för manuella skillnader.

Automatiseringen av de vita blodkroppsdifferentialerna började med uppfinningen av Coulter-räknaren , den första automatiserade hematologianalysatorn , i början av 1950-talet. Denna maskin använde elektriska impedansmätningar för att räkna celler och bestämma deras storlek, så att vita och röda blodkroppar kunde räknas upp. På 1970-talet utvecklades två tekniker för att utföra automatiserade differentiella räkningar: digital bildbehandling av objektglas och flödescytometritekniker med användning av ljusspridning och cellfärgning. Dessa metoder används fortfarande på moderna hematologianalysatorer.

Medicinsk användning

Den vita blodkroppsdifferensen är ett vanligt blodprov som ofta beställs tillsammans med ett fullständigt blodtal . Testet kan utföras som en del av en rutinmässig läkarundersökning ; att undersöka vissa symtom, särskilt de som tyder på infektion eller hematologiska störningar ; eller för att övervaka befintliga tillstånd, såsom blodproblem och inflammatoriska sjukdomar.

Fem typer av vita blodkroppar finns normalt i blod: neutrofiler , lymfocyter , monocyter , eosinofiler och basofiler . Markerade förskjutningar i proportionerna för dessa celltyper, mätt med den automatiska eller manuella differentialen, kan indikera olika hälsotillstånd. Dessutom kan celltyper som normalt inte förekommer i blodet, såsom blastceller , identifieras med den manuella skillnaden. Dessa celltyper kan hittas i blodproblem och andra patologiska tillstånd. Den manuella differentialen kan också identifiera förändringar i utseendet på vita blodkroppar, såsom reaktiva lymfocyter , eller funktioner såsom giftig granulering och vakuolering i neutrofiler. Resultaten av skillnaden i vita blodkroppar rapporteras som procenttal och absoluta värden. Absoluta antal vanligen rapporteras i enheter om celler per mikroliter (| il) eller 10 ⁹ celler per liter (L). Resultatet jämförs sedan med referensintervall , vilka definieras av enskilda laboratorier och kan variera beroende på olika patientpopulationer och testmetoder.

CBC och differentiell testning utförs vanligtvis på venöst eller kapillärt blod. Kapillärbloddragningar används vanligtvis för spädbarn och personer vars vener är svåra att komma åt. För att förhindra koagulering dras provet in i ett rör innehållande den antikoagulerande föreningen etylendiamintetraättiksyra (EDTA). Rör som innehåller natriumcitrat kan vara för patienter i vilka EDTA orsakar trombocytklumpning . Testet utförs på helblod, vilket betyder blod som inte har centrifugerats .

Typer

Manuell differential

Den manuella differentieringstekniken gör att celler kan klassificeras baserat på subtila förändringar i utseende, som i dessa reaktiva lymfocyter som ses hos en person med infektiös mononukleos .

I en manuell differential undersöks ett färgat blodutstryk under ett mikroskop och vita blodkroppar räknas och klassificeras baserat på deras utseende. En manuell differentiering utförs vanligtvis när den automatiska skillnaden flaggas för granskning eller när vårdgivaren begär det. Om den manuella skillnaden visar resultat som tyder på vissa allvarliga tillstånd, såsom leukemi, hänvisas blodutstrykningen till en läkare (vanligtvis en hematolog eller patolog ) för bekräftelse.

Procedur

Närbild av den befjädrade kanten av ett fläckat blodutstryk

En blodutstrykning bereds genom att placera en droppe blod på ett objektglas och använda en andra bild som hålls i en vinkel för att sprida blodet och dra det över bilden och bilda en "fjäderkant" bestående av ett enda lager av celler vid slutet av smetan. Detta kan göras för hand eller med hjälp av en automatiserad bildtillverkare kopplad till en hematologianalysator. Sliden behandlas med en Romanowsky-fläck, vanligtvis Wrights fläck eller Wright-Giemsa, och undersöks under mikroskopet. Smet undersöks i ett systematiskt mönster, skannar från sida till sida inom den fjäderade kanten och räknar celler i följd. Differentialen utförs vanligtvis vid 400x eller 500x förstoring , men 1000x förstoring kan användas om onormala celler är närvarande. Celler identifieras baserat på deras morfologiska egenskaper, såsom storleken och strukturen på deras kärna och färgen och strukturen på deras cytoplasma. Detta gör det möjligt att identifiera onormala celltyper och förändringar i cellulärt utseende. I de flesta fall räknar mikroskopisten 100 vita blodkroppar, men 200 kan räknas för bättre representation om antalet vita blodkroppar är högt. Det manuella differentiella antalet producerar procent av varje celltyp, som kan multipliceras med det totala antalet vita blodkroppar från analysatorn för att härleda de absoluta värdena.

Den manuella skillnaden kan automatiseras delvis med programvara för digital mikroskopi, som använder artificiell intelligens för att klassificera vita blodkroppar från mikrofotografier av blodutstryk . Denna teknik kräver dock bekräftelse genom manuell granskning.

Begränsningar

Eftersom relativt få celler räknas i den manuella skillnaden är variationen högre än i automatiserade tekniker, särskilt när celler finns i låga mängder. Till exempel, i ett prov som innehåller 5 procent monocyter kan de manuella differentieringsresultaten vara mellan 1 och 10 procent på grund av provvariation . Dessutom är cellidentifiering subjektiv och noggrannheten beror på den person som läser bilden. Dålig beredning av blodsprut kan orsaka en ojämn fördelning av vita blodkroppar, vilket resulterar i felaktig räkning och felaktig färgning kan hindra cellidentifiering. Sammantaget uppvisar manuella differentialräkningar variationskoefficienter (CV) som sträcker sig från 5 till 10 procent, medan automatiserade differentiella räkningar av normala neutrofiler och lymfocyter har CV på cirka 3 procent.

I leukemier och andra hematologiska maligniteter har släktlinjen och de genetiska egenskaperna hos vita blodkroppar viktiga konsekvenser för behandling och prognos, och cellernas mikroskopiska utseende är ofta otillräckligt för noggrann klassificering. I dessa fall kan andra tekniker såsom immunfenotyp genom flödescytometri eller speciell färgning användas för att definitivt identifiera cellerna.

Automatiserad differential

Exempel på ett differentiellt scattergram för vita blodkroppar: kluster med olika färg indikerar olika cellpopulationer

De flesta hematologianalysatorer ger en femdelad differentiell uppräkning av neutrofiler, lymfocyter, monocyter, eosinofiler och basofiler. Vissa instrument kan också räkna omogna granulocyter och kärnformade röda blodkroppar . Hematologianalysatorer mäter olika egenskaper hos vita blodkroppar, såsom impedans, ljusspridningsparametrar och färgningsreaktioner. Dessa data analyseras och ritas på ett scattergram och bildar distinkta kluster som motsvarar vita blodkroppstyper. Analysatorn räknar mycket fler celler än vad som räknas i en manuell differential, vilket resulterar i förbättrad precision. Om onormala funktioner eller cellpopulationer som analysatorn inte kan identifiera finns kan instrumentet rapportera resultaten för manuell granskning av blodutstryk.

Procedur

En automatiserad hematologianalysator (Sysmex XT-4000i)

Vanliga tekniker som används av hematologianalysatorer för att identifiera celler inkluderar ljusspridning, Coulter-räkning och cytokemisk färgningsteknik. Vissa analysatorer använder också radiofrekvensanalys och monoklonal antikroppsmärkning för att identifiera celler. Färgtekniker som används i differentiella analysatorer innefattar färgning av myeloperoxidas , ett enzym som finns i celler av myeloisk härkomst, och nukleinsyror , som finns i högre koncentrationer i omogna celler.

En liten mängd blod (så lågt som 150 mikroliter) sugs in i analysatorn, där reagens appliceras för att lysera röda blodkroppar och bevara vita blodkroppar. Provet späds och skickas in i en flödescell, som använder hydrodynamisk fokusering för att isolera enstaka celler för noggrann analys av deras egenskaper. Olika cellulära parametrar, såsom storlek, komplexitet och färgningsreaktioner, mäts och analyseras för att identifiera cellpopulationer. Basofiler kvantifieras ofta med hjälp av ett reagens som lyserar cytoplasman i andra vita blodkroppar men lämnar basofiler intakta. Prover som har onormala resultat eller misstänks innehålla onormala celler flaggas av analysatorn för manuell granskning av blodutstryk.

För att säkerställa att resultaten från den automatiska analysatorn är korrekt körs kvalitetskontrollprover minst en gång om dagen. Detta är prover med kända resultat som oftast tillhandahålls av instrumenttillverkaren. Laboratorier jämför sina olika resultat med kända värden för att säkerställa att instrumentet fungerar korrekt. En rörlig genomsnittsmätning kan också användas, där medelresultaten för patientprover mäts med vissa intervall. Förutsatt att egenskaperna hos patientpopulationen förblir ungefär desamma över tiden bör genomsnittet förbli konstant. Stora förändringar i medelvärdet kan indikera instrumentproblem.

Begränsningar

När omogna eller onormala vita blodkroppar förekommer kan automatiserade differentieringsresultat vara felaktiga, vilket kräver en manuell granskning av blodutstryk. Sammantaget flaggas 10 till 25 procent av CBC-proverna för manuell granskning av analysatorn. Även om de flesta onormala prover flaggas automatiskt kan vissa missas; omvänt kan analysatorer generera falskt positiva flaggor när inga onormala celler finns. Hematologilaboratorier kompenserar för dessa problem genom att kräva en utstrykningsgranskning när differential- eller CBC-resultat faller utanför vissa numeriska trösklar, oavsett om det finns analysatorflaggor. Den känslighet och specificitet av analysatorns flaggning kan bestämmas genom att jämföra analyzer flaggor till manuella differentialresultat.

Det automatiserade basofilantalet är notoriskt opålitligt, ofta underskattar antalet i basofili och ger falskt förhöjda resultat i närvaro av onormala celler. Manuell differens anses därför vara referensmetoden för dessa celler.

Analysatorer kan räkna kärnbildade röda blodkroppar, jätte och klumpiga blodplättar och röda blodkroppar som innehåller onormala hemoglobiner (såsom hemoglobin S vid sicklecellsjukdom ) som vita blodkroppar, vilket leder till felaktiga differentiella resultat. Automatiserade differentiella räkningar på åldrade prover kan vara felaktiga på grund av cellulär degeneration.

Celltyper och resultattolkning

Neutrofil

Neutrofiler är de vanligaste vita blodkropparna i normalt vuxenblod. När de färgas med en Romanowsky-fläck, uppvisar de en flerkärnig kärna och rosa cytoplasma som innehåller små lila granuler.

Neutrofilantalet är normalt högre hos nyfödda och gravida kvinnor än i andra grupper. Utanför dessa tillstånd är ökat antal neutrofiler ( neutrofili ) associerat med bakteriell infektion , inflammation och olika former av fysiologisk stress. Neutrofilantal kan bli extremt högt som svar på vissa infektioner och inflammatoriska tillstånd, vilket kallas leukemoidreaktion eftersom det höga antalet vita blodkroppar härmar leukemi. Neutrofili kan också förekomma vid myeloproliferativa störningar .
Neutropeni , vilket betyder ett lågt antal neutrofiler, kan förekomma som ett svar på läkemedelsbehandling (särskilt kemoterapi) eller vid vissa infektioner, såsom tuberkulos och gramnegativ sepsis . Neutropeni förekommer också i många hematologiska störningar, såsom leukemi och myelodysplastiskt syndrom , och i en mängd olika autoimmuna och medfödda sjukdomar. Ett neutrofilantal under referensintervallet kan vara normalt hos individer av vissa etniciteter; detta kallas godartad etnisk neutropeni . Mycket låga antal neutrofiler är associerade med immunsuppression .

När de stimuleras av infektion eller inflammation kan neutrofiler utveckla onormala egenskaper i deras cytoplasma, såsom giftig granulering , giftig vakuolering och Döhle-kroppar . Dessa funktioner, som orsakas av frisättning av cytokiner , kallas kollektivt som toxiska förändringar.

Lymfocyt

Lymfocyter , som är den näst vanligaste typen av vita blodkroppar hos vuxna, är vanligtvis små celler med en rund, mörk kärna och en tunn remsa av ljusblå cytoplasma. Vissa lymfocyter är större och innehåller några blå granuler.

Ökat antal lymfocyter ( lymfocytos ) kan orsakas av virusinfektioner och kan också förekomma efter splenektomi . Barn har högre antal lymfocyter än vuxna. Kronisk lymfocytisk leukemi uppvisar ett förhöjt lymfocytantal och onormal lymfocytmorfologi, där lymfocyterna har extremt täta, klumpiga kärnor och vissa celler verkar fläckiga på blodutstrykningen.
Lågt antal lymfocyter ( lymfopeni ) kan ses vid infektioner som HIV / AIDS , influensa och viral hepatit , liksom i underenäring av proteinenergi , akuta sjukdomar och läkemedelsreaktioner.

Som svar på virusinfektioner (särskilt infektiös mononukleos ) kan lymfocyter öka kraftigt i storlek, utveckla ovanligt formade kärnor och stora mängder mörkblå cytoplasma. Sådana celler kallas reaktiva eller atypiska lymfocyter och när de är närvarande kommenteras de antingen eller räknas separat från normala lymfocyter i den manuella skillnaden.

Monocyt

Monocyter är stora celler med en krökt eller vikad kärna och fingranulerad, gråblå cytoplasma som ofta innehåller vakuoler . Monocyter är den tredje vanligaste vita blodkroppen efter neutrofiler och lymfocyter.

Ökade monocytantal ( monocytos ) ses vid kronisk infektion och inflammation. Extremt höga monocytantal, liksom omogna former av monocyter, förekommer vid kronisk myelomonocytisk leukemi och akuta leukemier av monocytiskt ursprung. Monocytantalet kan minskas ( monocytopeni ) hos individer som får kemoterapi såväl som de med aplastisk anemi , svåra brännskador och aids.

Eosinofil

Eosinofiler har stora orange granuler i deras cytoplasma och bi-flikiga kärnor. De finns i låga mängder i normalt blod.

Förhöjt antal eosinofiler ( eosinofili ) är förknippat med allergiska reaktioner , parasitinfektioner och astma. Antalet eosinofiler kan minskas under graviditet och som svar på fysiologisk stress, inflammation eller behandling med vissa läkemedel, såsom steroider och adrenalin .

Basofil

Basofiler uppvisar stora, mörklila granuler som ofta täcker cellens kärna. De är de sällsynta av de fem normala celltyperna.

Basofili och eosinofili kan förekomma tillsammans med andra avvikelser i vita blodkroppar vid kronisk myeloid leukemi och andra myeloproliferativa störningar. Ett ökat basofilantal kan också ses i överkänslighetsreaktioner och efter splenektomi. Basofilantalet kan minska under ägglossningen , steroidbehandlingen och perioder med fysiologisk stress.

Bandneutrofil

Bandneutrofiler är unga former av neutrofiler som saknar segmentering av kärnan . Dessa celler, som identifieras genom manuell räkning, finns i lågt antal i normalt vuxenblod.

En vänsterförskjutning , vilket innebär en ökning av bandneutrofiler eller omogna granulocyter, kan indikera infektion, inflammation eller benmärgsstörningar, även om det också kan vara ett normalt fynd under graviditeten . Vissa laboratorier skiljer inte band från mogna neutrofiler i differentialräkningen eftersom klassificeringen är mycket subjektiv och opålitlig.

Omogna granulocyter

Omogna granulocyter är omogna former av neutrofiler och andra granulocyter (eosinofiler och basofiler). Denna klassificering består av metamyelocyter , myelocyter och promyelocyter , som kan räknas upp separat i den manuella differentialen eller rapporteras tillsammans som omogna granulocyter (IG) genom automatiserade metoder. Omogna granulocyter finns normalt i benmärgen , men inte i perifert blod.

Om de finns i betydande mängder i blodet kan omogna granulocyter indikera infektion och inflammation, liksom myeloproliferativ sjukdom , leukemi och andra tillstånd som påverkar märgen. IG kan också öka i steroidanvändning och graviditet. Kronisk myeloid leukemi uppvisar ofta ett stort antal omogna granulocyter i perifert blod. Onormala promyelocyter med flera Auer-stavar , kallade fagotceller , förekommer i akut promyelocytisk leukemi .

Sprängcell

Blastceller är mycket omogna celler som normalt finns i benmärgen, där de utvecklas till mogna celler ( hematopoies ) innan de släpps ut i blodet. De kan identifieras genom sin stora totala storlek, djupblå cytoplasma och stora kärna med fint kromatin och framträdande nukleoli .

Blastceller, som ses på blodutstrykningen, är ett onormalt resultat och kan vara en indikation på akut leukemi eller andra allvarliga blodsjukdomar. Sällan kan de ses i svåra fall av vänsterskift. Närvaron av Auer-stavar inuti explosionsceller indikerar att de är av myeloidt ursprung, vilket har viktiga konsekvenser för leukemibehandling. Andra morfologiska funktioner kan ge information om sprängcellernas släktlinje: till exempel tenderar myeloblaster att vara stora med distinkta nukleoler, medan lymfoblaster kan vara mindre med ett tätare kromatinmönster. Dessa funktioner är dock inte diagnostiska, och flödescytometri eller speciell färgning används vanligtvis för att bekräfta härstamningen.

Andra celler

Olika andra onormala celler kan förekomma i blodet under vissa förhållanden. Exempelvis kan lymfomceller hittas på den manuella avvikelsen i vissa fall av lymfom , och i mastcellsleukemi , mastceller , som normalt är begränsade till vävnad, cirkulerar i blodet. Det finns ett mycket sällsynt fenomen som kallas karcinocytemi där tumörceller ses på perifert blodutstryk.

Historia

Innan automatiserade cellräknare infördes utfördes cellräkningar manuellt; vita och röda blodkroppar och trombocyter räknades med hjälp av mikroskop. Den första personen som publicerade mikroskopiska observationer av blodkroppar var Antonie van Leeuwenhoek , som rapporterade om de röda blodkropparnas utseende i ett brev från 1674 till Proceedings of the Royal Society of London ; Jan Swammerdam hade beskrivit röda blodkroppar några år tidigare, men hade inte publicerat sina resultat vid den tiden. Under hela 1700- och 1800-talen tillät förbättringar av mikroskopteknologi, såsom akromatiska linser, vita blodkroppar och blodplättar att räknas i ofärgade prover. På 1870-talet utvecklade Paul Ehrlich en färgningsteknik som kunde skilja mellan de fem vita blodkroppstyperna. Ehrlichs fläck använde en kombination av ett surt och basiskt färgämne för att fläcka vita och röda blodkroppar samtidigt. Dmitri Leonidovich Romanowsky förbättrade denna teknik på 1890-talet genom att använda en blandning av eosin och åldrat metylenblått , vilket gav ett brett spektrum av nyanser som inte fanns när någon av fläckarna användes ensam. Detta kallades Romanowsky-effekten och blev grunden för Romanowsky-färgning , den teknik som fortfarande används för att fläcka blodutstryk för manuella skillnader.

Vid de tidiga åren av 1900-talet hade skillnaden i vita blodkroppar blivit en vanlig praxis i USA, men svårigheter att tolka resultaten sätter tvivel om testets användbarhet. 1906 introducerade Charles Langdon Gibson Gibson-diagrammet, som jämförde det totala antalet vita blodkroppar mot neutrofilantalet för att skilja mellan " pyogena " och "icke-pyogena" tillstånd och för att förutsäga svårighetsgraden av infektioner. Ungefär samma tid föreslog Josef Arneth ett system för klassificering av neutrofiler efter deras antal kärnlober - benämnt "lobindex" eller Arneth-räkning - och fastställde en uppsättning referensområden för neutrofil lobularitet. Arneths analys av neutrofilsegmentering visade sig senare ha begränsad klinisk betydelse, men associeringen av hypersegmenterade neutrofiler med vitamin B12 och folatbrist förblir accepterad. Viktor Schilling  [ de ] 1912 föreslog en annan klassificering av neutrofiler, separerade dem i " myelozyten , jugendliche , stabkernige och segmentkernige " - det vill säga myelocyter, "ungdomar" (metamyelocyter), bandneutrofiler (ibland kallade "sticks") och mogna, helt segmenterade neutrofiler - och påpekade den kliniska betydelsen av den neutrofila vänsterförskjutningen i samband med antalet vita blodkroppar och förekomsten av toxiska förändringar. Schillings monografi, Das Blutbild und seine klinische Verwertung ( blodbilden och dess kliniska betydelse ), översattes till engelska 1926, och hans neutrofila klassificeringssystem fann snabbt acceptans i amerikanska laboratorier.

Den första automatiska hematologianalysatorn, Coulter counter , uppfanns i början av 1950-talet av Wallace H. Coulter . Analysatorn arbetade med Coulter-principen, som säger att när celler hängs upp i en vätska som bär en elektrisk ström och passerar genom en bländare, orsakar de minskningar i strömmen som är proportionell mot deras volym på grund av deras dåliga elektriska ledningsförmåga . Antalet och storleken på dessa minskningar kan användas för att räkna blodkroppar och beräkna deras storlek. Coulter-räknaren var ursprungligen utformad för att räkna röda blodkroppar , men den visade sig vara effektiv även för att räkna vita blodkroppar.

Modell A Coulter-räknare, den första kommersiella hematologianalysatorn

Efter att grundläggande cellräkning hade automatiserats, förblev skillnaden i vita blodkroppar en utmaning. Forskning om automatisering av differentialräkningen började på 1970-talet och tog två huvudmetoder: digital bildbehandling och flödescytometri. Med hjälp av teknik som utvecklades på 1950- och 60-talet för att automatisera avläsningen av Pap smears , producerades flera modeller av bildbehandlingsanalysatorer. Dessa instrument skulle skanna ett fläckat blodutstryk för att hitta cellkärnor och sedan ta en högre upplösning av cellen för att analysera den genom densitometri . De var dyra, långsamma och gjorde inte mycket för att minska arbetsbelastningen i laboratoriet eftersom de fortfarande krävde att blodutstryk skulle förberedas och färgas, så flödescytometri-baserade system blev mer populära och 1990 var inga digitala bildanalysatorer kommersiellt tillgängliga i USA eller Västeuropa. Dessa tekniker fick en återuppkomst på 2000-talet med introduktionen av mer avancerade bildanalysplattformar med konstgjorda neurala nätverk .

Cytometrianordningar med tidigt flöde sköt ljusstrålar mot celler i specifika våglängder och mätte den resulterande absorbansen, fluorescensen eller ljusspridningen, samlade information om cellernas egenskaper och möjliggjorde kvantifiering av cellulärt innehåll såsom DNA . Ett sådant instrument - Rapid Cell Spectrophotometer, som utvecklades av Louis Kamentsky 1965 för att automatisera cervikal cytologi - skulle kunna generera spridning av blodceller med hjälp av cytokemiska färgningstekniker. Leonard Ornstein, som hade hjälpt till att utveckla färgningssystemet på Rapid Cell Spectrophotometer, och hans kollegor skapade senare den första kommersiella flödescytometriska differentiella analysatorn för vita blodkroppar, Hemalog D. Infördes 1974 använde denna analysator ljusspridning, absorbans och cell färgning för att identifiera de fem normala vita blodkroppstyperna utöver "stora oidentifierade celler", en klassificering som vanligtvis bestod av atypiska lymfocyter eller blastceller. Hemalog D kunde räkna 10 000 celler i en körning, en markant förbättring jämfört med den manuella skillnaden. År 1977 uppskattades att "minst 200" automatiserade differentiella analysatorer var i bruk över hela världen. 1981 kombinerade Technicon Hemalog D med Hemalog-8-analysatorn för att producera Technicon H6000, den första kombinerade kompletta blodräkningen och differentialanalysatorn. Denna analysator var impopulär bland hematologilaboratorier eftersom den var arbetskrävande att använda, men i slutet av 1980-talet till början av 1990-talet producerades liknande system i stor utsträckning av andra tillverkare som Sysmex , Abbott , Roche och Beckman Coulter .

Se även

• Flödescytometri
• Cellräkning

Referenser

Bibliografi