QuantiFERON - QuantiFERON

Interferon-gamma-frisläppningsanalyser ( IGRA ) är diagnostiska verktyg för latent tuberkulosinfektion (LTBI). De är surrogatmarkörer för Mycobacterium tuberculosis -infektion och indikerar ett cellulärt immunsvar mot M. tuberculosis om den senare är närvarande.

Aktiv vs latent tuberkulos

IGRA kan inte skilja mellan latent infektion och aktiv tuberkulos (TB), och bör inte användas som en enda metod för diagnos av aktiv TB, vilket är en mikrobiologisk diagnos. Ett positivt IGRA-resultat indikerar inte nödvändigtvis TB-infektion, men kan också orsakas av infektion med icke-tuberkulösa mykobakterier. En negativ IGRA utesluter inte aktiv TB -sjukdom; ett antal studier har visat att upp till en fjärdedel av patienterna med aktiv tuberkulos har negativa IGRA -resultat.

BCG -status

Eftersom IGRA inte påverkas av Bacille Calmette-Guérin (BCG) vaccinationsstatus är IGRA användbara för utvärdering av LTBI hos BCG-vaccinerade individer, särskilt i miljöer där BCG-vaccination administreras efter spädbarn eller flera (booster) BCG-vaccinationer ges. Däremot varierar specificiteten för tuberkulin hudtest (TST) beroende på tidpunkten för BCG och om upprepade (booster) vaccinationer ges.

Kommersiellt IGRA -test

QuantiFERON , även känt som QFT, är det registrerade varumärket för en interferon gamma release analys (IGRA) för tuberkulosdiagnos tillverkad av QIAGEN . QFT-GIT-analysen är ett ELISA- baserat helblodstest som använder peptider från tre TB-antigener (ESAT-6, CFP-10 och TB7.7) i ett rörformat. Resultatet rapporteras som kvantifiering av IFN-gamma i internationella enheter (IE) per ml. En individ anses vara positiv för M. tuberculosis- infektion om IFN-gamma-svaret på TB-antigener ligger över testgränsen (efter att ha dragit ifrån bakgrunden IFN-gamma-svaret i den negativa kontrollen).

Mantoux vs IGRA test

Eftersom IGRA är mer kostsamma och tekniskt komplexa att göra än Mantoux-testet , rekommenderade WHO i sitt 2011 års uttalande inte att ersätta Mantoux-testet med IGRA som ett folkhälsoinsats i låg- och medelinkomstländer.

QuantiFERON-TB (QFT)

QuantiFERON-TB Gold In-Tube (QFT-GIT) , tredje generationens test, har ersatt QuantiFERON-TB (QFT) och QuantiFERON-Gold, som inte längre marknadsförs.

Enligt US Centers for Disease Control , 2001 godkändes QuantiFERON-TB-testet (QFT) av Food and Drug Administration (FDA) som ett hjälpmedel för att upptäcka latent Mycobacterium tuberculosis- infektion. Detta test är ett in vitro-diagnostiskt hjälpmedel som mäter en komponent i cellmedierad immunreaktivitet mot M. tuberculosis . Testet är baserat på kvantifiering av interferon-gamma (IFN-γ) frisatt från sensibiliserade lymfocyter i helblod inkuberat över natten med renat proteinderivat (PPD) från M. tuberculosis och kontrollantigener.

Tuberkulin hudtest (TST) har använts i flera år som ett hjälpmedel för att diagnostisera latent tuberkulosinfektion (LTBI) och inkluderar mätning av fördröjd typ av överkänslighetsrespons 48–72 timmar efter intradermal injektion av PPD. TST och QFT mäter inte samma komponenter i det immunologiska svaret och är inte utbytbara. Bedömningen av dessa testers noggrannhet begränsas av bristen på en standard för bekräftelse av LTBI.

Som ett diagnostiskt test, QFT:

  1. kräver flebotomi
  2. kan uppnås efter ett enda patientbesök
  3. bedömer svar på flera antigener samtidigt
  4. ökar inte anamnestiska immunsvar (se Latent tuberkulos#Boosting ).

Jämfört med TST är QFT -resultat mindre utsatta för läsare och fel. I en CDC-sponsrad multicenterstudie var QFT- och TST-resultaten måttligt överensstämmande (totalt kappavärde = 0,60). Konkordansnivån påverkades negativt av tidigare bacille Calmette-Guérin (BCG) -vaccination , immunreaktivitet mot icke-tuberkulösa mykobakterier (NTM) och en tidigare positiv TST. Förutom multicenterstudien har två andra publicerade studier visat måttlig överensstämmelse mellan TST och QFT. En av de fem platserna som är involverade i CDC -studien rapporterade dock mindre överensstämmelse. Även om det har funnits studier som bekräftar den ökade framtida risken för aktiv tuberkulos hos individer med positiv TST, var samma sak inte sant för dem med ett positivt IGRA -resultat. En nyligen publicerad studie visade att ett positivt IGRA -resultat är förutsägande för framtida aktiv TB -risk. Dessutom var IGRA minst lika känslig och var mer specifik jämfört med traditionell TST. I denna studie av immunkompetenta nyligen exponerade nära kontakter med aktiva TB -fall var progressionshastigheten till aktiv sjukdom bland obehandlade QFT -positiva individer signifikant större än för obehandlade TST -positiva (14,6% kontra 2,3%). Även om siffrorna var små, var alla nära kontakter som fortsatte att utveckla aktiv TB QFT -positiva, men bara 83% var TST -positiva.

Som nämnts ovan kan tidigare BCG -vaccination ge falskt positiva TST -resultat. I en studie av militär personal som återvände från uppdrag var ungefär hälften av de positiva TST falskt positiva. I en nyare studie av militärer som återvänder från uppdrag har Franken et al. rapporterade bevis som tyder på falskt positiva TST-resultat är vanliga och att QFT-testning kan vägleda mer målinriktad behandling och lindra onödig anti-tuberkulös behandling.

FDA: s cutpoint för ett positivt resultat fastställdes till> 0,34 internationella enheter/milliliter (IU/ml), även om detta har visat sig fungera problematiskt i områden med låg prevalens, till exempel bland amerikanska och kanadensiska sjukvårdspersonal. I områden med låg risk och låg prevalens minskar det positiva prediktiva värdet för varje test. När det gäller seriellt screenade nordamerikanska sjukvårdspersonal ger QFT-resultat strax ovanför denna gränspunkt falskt positiva testresultat som vid upprepade tester återgår till negativa, där tuberkulos screening ofta är mandat på årsbasis. Forskning vid Stanford University och Veterans Administration har rapporterat användningen av en omprovningszon (eller gränszon) under 1,1 IE/ml lindrar 76% av falskt positiva eller reverseringar.

Begränsningar av QFT inkluderar behovet av att dra blod och bearbeta det inom 16 timmar efter insamling och begränsad laboratorie- och klinisk erfarenhet av analysen. Det finns behov av ytterligare studier av QFT: s användbarhet för att förutsäga utvecklingen till aktiv tuberkulos, särskilt hos barn och immunkompromitterade värdar.

Till dess nackdel kan QFT ge falskt positiva resultat med Mycobacterium szulgai , Mycobacterium kansasii och Mycobacterium marinum .

QuantiFERON-TB guld

QuantiFERON-TB Gold-testet (QFT-G) är ett helblodstest för användning som hjälpmedel vid diagnos av Mycobacterium tuberculosis- infektion, inklusive latent tuberkulosinfektion (LTBI) och tuberkulos (TB). Detta test godkändes av US Food and Drug Administration (FDA) 2005.

Blodprover blandas med antigener (ämnen som kan producera ett immunsvar) och kontroller. För QFT-G inkluderar antigenerna blandningar av syntetiska peptider som representerar två M. tuberculosis- proteiner, ESAT-6 och CFP-10 . Efter inkubation av blodet med antigener i 16 till 24 timmar mäts mängden interferon-gamma (IFN-gamma).

Om patienten är infekterad med M. tuberculosis , kommer deras vita blodkroppar att frigöra IFN-gamma som svar på kontakt med TB- antigenerna . QFT-G-resultaten baseras på mängden IFN-gamma som frigörs som svar på antigenerna.

Klinisk utvärdering och ytterligare tester (till exempel en röntgenbild av bröstet , sputum och odling) behövs för att skilja mellan en diagnos av latent TB eller aktiv TB.

Fördelarna med testet är:

  • Kräver ett enda patientbesök för att ta ett blodprov.
  • Resultat kan vara tillgängliga inom 24 timmar.
  • Ökar inte svaren mätt med efterföljande tester, vilket kan hända med tuberkulin hudtest (TST).
  • Är inte föremål för läsarbias som kan uppstå med TST.
  • Påverkas inte av tidigare BCG-vaccination (bacille Calmette-Guérin).

Nackdelar och begränsningar med testet är:

  • Blodprover måste behandlas inom 16 timmar efter insamling medan vita blodkroppar fortfarande är livskraftiga.
  • Det finns begränsade uppgifter om användningen av QFT-G hos barn yngre än 17 år, bland personer som nyligen utsatts för M. tuberkulos och hos personer med nedsatt immunförsvar (t.ex. nedsatt immunfunktion orsakad av HIV-infektion eller förvärvat immunbristsyndrom [AIDS] , aktuell behandling med immunsuppressiva läkemedel, utvalda hematologiska störningar, specifika maligniteter, diabetes, silikos och kroniskt njursvikt ).
  • Fel vid insamling eller transport av blodprover eller vid körning och tolkning av analysen kan minska noggrannheten hos QFT-G.
  • Variabilitet, en stor fråga som påverkar resultatet negativt. Mer automatisering kommer att behövas för att exakt mäta QFT -svaret.
  • Begränsad information om användning av QFT-G för att avgöra vem som löper risk att utveckla TB-sjukdom.

QuantiFERON-TB guldrör

Den 10/10/2007 godkände amerikanska FDA att Quantiferon TB Gold In Tube skulle marknadsföras i USA

FDA säger:

Godkännande för en modifiering av kvantiferon-tb-guldet till ett insamlingssystem som består av tre bloduppsamlingsrör, noll, tb-antigen och mitogen. Enheten, som modifierad, kommer att marknadsföras under handelsnamnet quantiferon-tb gold in-tube och är indicerad för användning som ett in vitro-diagnostiskt test med en peptidcocktail som simulerar esat-6, cfp-10 och tb 7.7 (p4) proteiner för att stimulera celler i hepariniserat helblod som dras direkt in i specialiserade blodinsamlingsrör. Detektion av interferon-y genom enzymkopplad immunosorbentanalys (elisa) används för att identifiera in vitro-svar på dessa peptidantigener som är associerade med mycobacterium tuberculosis-infektion.

Enligt den FDA -godkända bipacksedeln har Quantiferon TB Gold In Tube en konsekvent specificitet på> 99% hos personer med låg risk och en känslighet så hög som 92% hos personer med aktiv sjukdom, beroende på sjukdomens omfattning och omfattning. Specificiteten i två studier av några hundra personer är 96-98% i en hälsoimmuniserad befolkning.

Bipacksedeln informerar också om att satsen innehåller tre uppsamlingsrör som har torkat antigener på sina väggar och att dessa rör måste överföras till en inkubator inom 16 timmar efter bloduppsamling.

Den 25 juni 2010 uppdaterade de amerikanska centren för sjukdomskontroll och förebyggande åtgärder (CDC) riktlinjerna för testning av tuberkulos (TB) som ger vägledning till amerikanska folkhälsovårdare, kliniker och laboratoriearbetare angående screening för och diagnos av TB -infektion. De uppdaterade riktlinjerna ger en ny riktning för TB -kontroll i USA.

Tidigare kunde QuantiFERON®-TB Gold användas i alla situationer där Tuberculin Skin Test (TST) användes, utan preferens. 2010 års riktlinjer fastställer ett nytt riktmärke eftersom de rekommenderar IGRA som den föredragna TB -testmetoden hos många patienter, inklusive de som är BCG -vaccinerade eller sannolikt inte kommer tillbaka för TST -avläsning.

Tillgänglighet

I USA är testet allmänt tillgängligt från statliga folkhälsolaboratorier, sjukhus och kommersiella laboratorier .

I januari 2008 informerade CDC - via sitt TB Notes Newsletter - TB -kontroller och andra om en länk till en lista över laboratorier i USA och Kanada som erbjuder att utföra Quantiferon Gold -testet.

California Tuberculosis Controllers Association har också tillhandahållit en lista över folkhälsolaboratorier i Kalifornien som testar med Quantiferon.

Referenser