Kinyoun fläck - Kinyoun stain

Den Kinyoun metoden eller Kinyoun bets (kall metod), som utvecklats av Joseph J. Kinyoun , är ett förfarande som används för att fläcksyrafasta arter av bakteriesläkten Mycobacterium och Nocardia och apicomplexan släktet Cryptosporidium . Det är en variant av en metod som utvecklades av Robert Koch 1882. Vissa bakteriearter har en vaxartad lipid som kallas mykolsyra, i cellväggarna som gör att de kan färgas med Acid-Fast bättre än en Gram-Stain. Mykobakteriernas unika förmåga att motstå avfärgning med syraalkohol är varför de kallas syrafasta. Det innebär applicering av en primär fläck ( basisk fuchsin ), en avfärgare (syraalkohol) och en motfärg ( metylenblått ). Till skillnad från Ziehl – ​​Neelsen -fläcken (ZN -fläck) kräver Kinyoun -färgningsmetoden ingen uppvärmning. I Ziehl – ​​Neelsen -fläcken fungerar värme som en fysisk bets medan fenol (karbol av carbol fuschin) fungerar som den kemiska beten. Eftersom Kinyoun -fläcken är en kall metod (ingen värme appliceras) ökar koncentrationen av carbol fuschin som används.

Sammanfattning av syrafast fläck (Kinyoun-fläck)
Tillämpning av Reagens Cellfärg
Surt snabbt Icke-syra snabbt
Primärt färgämne Carbol fuchsin Röd Röd
Avfärgare Sur alkohol Röd Färglös
Räknare Metylenblå Röd Blå

Färgningsprocedur

Kinyoun fläckar på organismen Mycobacterium smegmatis

Gör en syrafast fläck

Material

  • Slide med organism utstrykning
  • Carbol Fuchsin
  • Syra-alkohol
  • Metylenblå
  • häftigt papper
  • Mikroskop

Instruktioner

  1. Gör utstryk på en bild med organismer
    • Rengör objektglas, vaxetikettglas, sprid organismen, lufttorka i 10 minuter, värmefix
  2. Doppa objektglaset i Carbol Fuchsin i 20 minuter.
  3. Skölj objektglaset
  4. Doppa objektglaset i syraalkohol i 3-5 sekunder.
  5. Skölj bild
  6. Doppa objektglaset i metylenblått i 30 sekunder.
  7. Skölj bild
  8. Torka bilden med torrt papper.
  9. Observera under mikroskop.

Modifiering

Kinyoun -metoden kan modifieras som en svag syrafast fläck, som använder 5% svavelsyra istället för saltsyra. Den svaga syrafasta fläcken förutom färgning av mykobakterier kommer att fläcka organismer som inte kan upprätthålla karbolfuchsinet efter avfärgning med HCl.

Se även

Referenser

Stubbikon

Den här mikrobiologirelaterade artikeln är en stubbe . Du kan hjälpa Wikipedia genom att utöka den .