Syrafasthet - Acid-fastness

Mycobacterium tuberculosis (rödfärgad) i vävnad (blå).

Syrabeständighet är en fysikalisk egenskap hos vissa bakteriella och eukaryota celler, liksom vissa subcellulära strukturer, speciellt deras beständighet mot avfärgning av syror vid laboratoriefärgningsprocedurer. När de väl färgats som en del av ett prov kan dessa organismer motstå de syra- och/eller etanolbaserade avfärgningsprocedurer som är vanliga i många färgningsprotokoll, därav namnet syrafast .

Mekanismerna för syrafasthet varierar beroende på art, även om det mest kända exemplet är i släktet Mycobacterium , som inkluderar arten som är ansvarig för tuberkulos och spetälska. Syrafastheten hos Mycobacteria beror på det höga mykolsyrainnehållet i deras cellväggar , vilket är ansvarigt för färgmönstret för dålig absorption följt av hög retention. Vissa bakterier kan också vara delvis sura, till exempel Nocardia .

Syrafasta organismer är svåra att karakterisera med hjälp av mikrobiologiska standardtekniker, även om de kan färgas med koncentrerade färgämnen, särskilt när färgningsprocessen kombineras med värme. Vissa, till exempel Mycobacteria , kan färgas med Gram -fläcken , men de tar inte kristallviolett väl och verkar därmed ljuslila, vilket fortfarande kan resultera i en felaktig gramnegativ identifiering.

Den vanligaste färgningstekniken som används för att identifiera syrafasta bakterier är Ziehl – ​​Neelsen-fläcken , där de syrafasta arterna är färgade knallröda och tydligt sticker ut mot en blå bakgrund. En annan metod är Kinyoun -metoden , där bakterierna färgas knallröda och sticker tydligt ut mot en grön bakgrund. Syrafasta mykobakterier kan också visualiseras genom fluorescensmikroskopi med specifika fluorescerande färgämnen ( auramin-rodaminfläck , till exempel). Äggen från den parasitiska lungflukten Paragonimus westermani förstörs faktiskt av fläcken, vilket kan hindra diagnosen hos patienter som har TB-liknande symptom.

Några syra-snabba färgningstekniker

• Ziehl – ​​Neelsen -fläck (klassiska och modifierade bleketyper)
• Kinyoun fläck
• För färgblinda personer (eller i bakgrunder där det är svårt att upptäcka röda bakterier) kan Victoriablå ersättas med carbolfuchsin och pikrinsyra kan användas som motfläck istället för metylenblått , och resten av Kinyoun -tekniken kan användas.
  • Olika tekniker för färgning av bakteriespor med Kenyon, t.ex.
    • Möllers metod
    • Dorners metod (avfärgning av sur alkohol) utan Schaeffer – Fulton -modifieringen (avfärgas med vatten)
    • Tvättmedelsmetod med Tergitol 7, nonjoniska polyglykoleter ytaktiva ämnen typ NP-7
• Fite fläck
  • Fite-Faraco fläck
  • Wade Fite fläck
• Ellis och Zabrowarny fläck (ingen fenol/karbolsyra)
• Auramin-rodaminfläck
• Auraminfenolfläck

Anmärkningsvärda syrafasta strukturer

Mycket få strukturer är syrafasta; detta gör färgning för syrafasthet särskilt användbar vid diagnos. Följande är anmärkningsvärda exempel på strukturer som är syrafasta eller modifierade syrafasta:

• Alla mykobakterier - M. tuberculosis , M. leprae , M. smegmatis och atypisk Mycobacterium
• Actinomycetes (särskilt några aeroba) med mykolsyra i cellväggen (observera att Streptomyces INTE har); inte att förväxla med Actinomyces , som är ett icke-syrafast slag av aktinomycet
  • Nocardia (svagt syrafast; motstår avfärgning med svagare syrakoncentrationer)
  • Rhodococcus
  • Gordonia (en aktinomycet)
  • Tsukamurella
  • Dietzia
• Chef för sperma
• Bakteriesporer, se Endospore
• Legionella micdadei
• Vissa cellulära inneslutningar t.ex.
  • Cytoplasmatiska inklusionskroppar ses i
    • Neuroner i lager 5 av cerebral cortex neuronal ceroid lipofuscinosis ( Batten sjukdom ).
  • Nukleära inklusionsorgan som ses i
    • Blyförgiftning
    • Vismutförgiftning.
• Oocyster av vissa coccidian parasiter i avföring, såsom:
  • Cryptosporidium parvum ,
  • Isospora belli
  • Cyclospora cayetanensis .
• Några andra parasiter:
  • Sarcocystis
  • Taenia saginata ägg fläckar bra men Taenia solium ägg gör inte (kan användas för att skilja)
  • Hydatidcystor , särskilt deras " krokar " fläckar oregelbundet med ZN -fläckar men utstrålar ljusröd fluorescens under grönt ljus och kan hjälpa till att upptäcka i måttligt tunga bakgrunder eller med knappa krokar.
• Svampjästformer färgas inkonsekvent med syrafast fläck som anses vara en smalspektrumfläck för svampar. I en studie om svampens syrafasthet visade 60% av blastomyces och 47% av histoplasma positiv cytoplasmatisk färgning av de jästliknande cellerna, och Cryptococcus eller candida färgade inte, och mycket sällsynta färgningar sågs i Coccidioides endosporer.

Referenser

Exempel på online -protokoll

• Ziehl – ​​Neelsen -protokollet ( PDF -format).
• Alternativ Ellis & Zabrowarny-metod Arkiverad 2006-01-04 på Wayback-maskinen för färgning av AFB.